Beyotime碧云天lipo8000轉染試劑(c0533)現貨供應

產品名稱：Beyotime碧云天lipo8000轉染試劑(c0533)現貨供應

產品貨號：c0533

產品品牌：碧云天

產品簡介：

碧云天lipo8000轉染試劑(c0533)是碧云天最新研發的一種以納米材料為基礎的zui便捷的高效細胞轉染試劑，達到甚至超過了國際主流轉染試劑的轉染效果，并且轉染過程無須任何孵育時間，實現了細胞轉染的至簡操作。適用于把質粒、siRNA或其它形式的核酸包括DNA、RNA、寡核苷酸、以及核酸蛋白復合物或帶負電荷的蛋白轉染到真核細胞中，也可以用于活體動物的核酸轉染以及用于基因治療。

常見問題：

1. 轉染效率低：

a. 優化質粒與Lipo8000™轉染試劑比例，對于難轉染的細胞，可適當增加Lipo8000™轉染試劑的用量。

b. 應使用高純度、無菌、無污染物的質粒進行轉染，DNA純度方面A260/A280比值要接近1.8，通常宜控制在1.8-1.9范圍內，偏低則有可能有蛋白污染，偏高則有可能有RNA污染?？梢允褂帽淘铺焐a的質粒大量抽提試劑盒(D0026)進行抽提，以保證可以獲得較高的轉染效率。

c. 貼壁細胞轉染時狀態良好，細胞密度達70-80%時才可進行轉染，過稀或過密都可能影響轉染效率，不同細胞的最佳轉染密度需要自行摸索。懸浮細胞宜在對數生長期進行轉染。

d. 需使用無抗生素和無血清培養液配制Lipo8000™轉染試劑和質粒或siRNA等的混合物。

e. 轉染后培養時間不足，而被誤以為轉染效率偏低。不同細胞轉染后至顯著表達所需要培養的時間通常為24-48小時。

f. 檢查細胞是否有支原體感染，支原體感染會影響細胞增殖，并很可能影響轉染效率。

g. 使用傳代次數相對較少的細胞，細胞傳代次數太多，對轉染效率會有一定的影響。

h. 如果沒有檢測到目的蛋白表達，應該仔細核對轉染質粒的測序結果，確保測序結果和讀碼框wan全正確。啟動子、復制起始位點、質粒大小都會影響基因表達水平。

i. 如果靶基因的敲減(knockdown)效果欠佳，應該考慮嘗試設計不同的siRNA。

2. 出現一定程度的細胞毒性：

a. 轉染前，細胞至少鋪板 18-24 小時。

b. 質粒用量不變，Lipo8000™轉染試劑的用量減少 25%。例如通常六孔板每孔使用 2.5μg 質粒，4μl Lipo8000™，如果發現有細胞毒性，六孔板每孔可以嘗試使用 2.5μg 質粒，3μl Lipo8000™，此時經測試對于轉染效率沒有很明顯的影響。

c. 減少質粒用量，按照比例減少 Lipo8000™轉染試劑；或在前者的基礎上 Lipo8000™轉染試劑用量再減少 25%。

d. 檢查是否轉染時細胞密度太低，Lipo8000™轉染時細胞密度以 70-80%為佳。

e. 某些細胞對 Lipo8000™轉染試劑比較敏感，可以在轉染后 4-6 小時更換細胞培養液，轉染效率無顯著影響。

f. 檢查細胞是否有支原體等微生物污染。

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